X

Вы здесь

2015-02-19

Фармакокинетические параметры атипамезола при применении препаратов "Антиседан" и "Антимедин" собакам.

Денисенко В.Н., д.в.н., Смирнов А.А., к.б.н., Климов П.В.

ФГБОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной

медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина", ООО НПО "Апи-Сан".

 

Фармакокинетические параметры атипамезола при применении препаратов "Антиседан" (Pfizer Animal Health, США) и "Антимедин" (ООО НПО "Апи-Сан", Россия) собакам.

Изучали фармакокинетику атипамезола при внутримышечном введении собакам препаратов "Антиседан" и "Антимедин".

Определение атипамезола в сыворотке крови проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.

Сравнительное изучение фармакокинетических параметров атипамезола при применении препаратов "Антиседан" и "Антимедин" позволило заключить, что они являются биоэквивалентным.

Ключевые слова: "Атипамезол", "Антиседан", "Антимедин", "Фармакокинетика", "Биоэквивалентность".

 

Denisenko V.N., A.A. Smirnov, P.V. Klimov

Moscow state academy of veterinary and biotechnology named K.I. Skryabin, SPA Api-San, Ltd.

 

Pharmacokinetic parameters of atipamezole at the use of drugs "Antisedan" (Pfizer Animal Health, USA) and "Antimedin" SPA Api-San, Russia dogs.

We studied the pharmacokinetics of atipamezole with intramuscular preparations dogs "Antisedan" and "Antimedin".

Determination of atipamezole in serum were determined by high performance liquid chromatography with mass spectrometric detection.

Comparative study of the pharmacokinetic parameters when using drugs atipamezole "Antisedan" and "Antimedin" led to the conclusion that they are bioequivalent.

Keywords "Atipamezole" "Antisedan" "Antimedin", "Pharmacokinetics", "Bioequivalence".

Катехоламины - адреналин, норадреналин и дофамин - участвуют в нервных и гуморальных механизмах поддержания гомеостаза организма.

В синапсахони являются нейромедиаторами, обеспечивающими передачу возбуждения с нервного волокна клетками нервной, железистой ткани и гладкой мускулатуры.

Катехоламины из надпочечников поступают в кровь и воздействуют на клетки мишени всего организма.

Взаимодействие гормонов с клетками организма осуществляется при помощи адренорецепторов (1).

По характеру реакции на катехоламины адренорецепторы подразделяются на α1, α2 и β1, β2 подклассы. Путем применения селективных фармакологических препаратов, по-разному влияющих на отдельные подклассы медиаторов, можно получить разные клинические эффекты

Вещества, выводящие адренорецепторы из состояния физиологического равновесия, подразделяются на стимуляторы (агонисты) и блокаторы (антагонисты) рецепторов.

Антагонисты α2 - адренорецепторов в ветеринарной практике используются для устранения эффектов α2 - адренергических рецепторов.

В частности высокоспецифичным селективным α2 - антагонистом является атипамезол. Атипамезол нейтрализует седативный, иммобилизирующий, анальгетический и васкулярные эффекты медетомидина, который является агонистом α2 - адренорецепторов (2).

Гидрохлорид медетомидина является действующим веществом препарата Домитор (США), который вызывает угнетение центральной нервной системы и повышение болевого порога. Он используется при проведении хирургических операций на собаках и кошках и для снижения агрессивности животных (3).

В ветеринарной практике для устранения седативногои и анальгетического действия медетомидина у кошек и собак используется препарат "Антиседан" (Pfizer Animal Health, США), действующим началом в котором является атипамезола гидрохлорид. Фирмой Апи-Сан (Россия) предложен препарат "Антимедин", также содержащий атипамезола гидрохлорид в качестве действующего вещества.

В своей работе мы поставили цель провести сравнительное изучение фармакокинетики атипамезола гидрохлорида при применении собакам препаратов "Антиседан" и "Антимедин".

Материалы и методы

Работа выполнена на 18 овчароподобных метисах 1,5-2 летнего возраста, обоих полов, массой 18-20 кг. Животных содержали в вольерах, кормили сухим кормом по установленным нормам.

По принципу аналогов подопытные животные были разделены на 2 группы по 8 голов. Плацебо физраствор вводили собакам. Перед началом опытов все животные в течение 14 дней были выдержаны в карантине. Непосредственно перед введением препаратов у них измеряли температуру тела.

Препараты

"Антиседан" серия №1476667, срок годности до 04.2015. Стерильный, прозрачный, бесцветный раствор, содержащий 5 мг/мл атипамезола гидрохлорида (Pfizer Animal Health, США).

"Антимедин" серия №74102013, срок годности до 10.2015. Стерильный, прозрачный, бесцветный раствор, содержащий 5 мг/мл атипамезола гидрохлорида (ООО НПО "Апи-Сан" Россия).

Опыт проводили через 3 часа после кормления животных. Препараты вводили внутримышечно в область бедра в дозе 0,5 мл на 10 кг массы тела.

Кровь для исследования получали из яремной вены непосредственно перед введением и через 3.5, 10, 15, 20, 30, 45, 120 и 180 минут после введения препаратов. Сыворотку отделяли общепринятым способом и до исследования хранили в замороженном при -22 0 С виде.

Определение атипамезола в сыворотке крови собак проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием.

Была разработана оригинальная методика ВЭЖХ/МС/МС, подобраны параметры хроматографирования с учетом физико-химических свойств исследуемого вещества, особенностей имеющегося хроматографа и хроматографической колонки.

Использовали жидкостной хроматограф "Dionex Ultimate 3000" (Thermo Scientific, США) с тройным квадрупольным масс-спектрометрическим детектором "TSQ Quantum Access MAX (Thermo Scientific, США).

Условия хроматографирования

  • Колонка Pheonomenex C18(2), 3 мкм, 100А, 75х2мм;
  • Скорость потока: 150 мкл/мин;
  • Объем вводимой пробы: 5 мкл;
  • Время удерживания: 3,4 мин;
  • Время анализа: 5,0 мин;
  • Время поступления элюата в детектор: с 2,9 по 4,0 мин;
  • Режим элюирования: изократический;
  • Подвижная фаза: 0,1% раствор муравьиной кислоты в смеси ацетонитрил - вода (25,5 : 74,5).

Стандарт атипамезола гидрохлорида содержал 99,21% основного вещества (XIAMEN FINECHEMICAL IMPORT EXPERT Co.LTD).

Концентрацию атипамезола в испытуемых образцах рассчитывали методом внешнего стандарта с использованием программного обеспечения "Xcalibur 2.2" (Thermo Scientific, США). Калибровочные кривые строили на основании результатов анализа проб сыворотки крови интактных животных, к которым были добавлены известные количества атипамезола.

Подготовка проб сыворотки крови подопытных животных для анализа: к 200 мкл сыворотки добавляли 400 мкл ацетонитрила и перемешивали в течение 2 минут. Полученные смеси центрифугировали 5 минут. По 100 мкл супернатантов помещали в пробирки типа Эппендорф, добавляли по 166 мкл 0,1% раствора муравьиной кислоты в воде, встряхивали в течение 2 минут и центрифугировали 5 минут. Анализировали методом ВЭЖХ надосадочные растворы.

Результаты

Клинические показатели. Через 3-5 минут после введения "Антиседана" и "Антимедина" отмечали легкое возбуждение собак, легкую отдышку и усиление саливации.

Результаты анализа стандартных растворов атипамезола

Полученная при исследовании стандартных растворов атипамезола калибровочная кривая отражена на рисунке 2.

Анализ рисунка 2 показывает, что калибровочная кривая была линейна в пределах от 6,701 нг/мл до 214,440 нг/мл. Предел чувствительности по атипамезолу составил 0,7 нг/мл, предел количественного определения - 2,4 нг/мл. Коэффициент корреляции R2 - 0,9992.

Результаты анализа образцов сыворотки крови подопытных собак.

Данные, отражающие динамику атипамезола у подопытных собак после введения препаратов "Антиседан" и "Антимедин", отражены на рисунке 3.

Графическое изображение среднестатистических показателей фармакокинетики атипамезола при внутримышечном введении препаратов "Антиседан" и "Антимедин" подопытным собакам отражено на рисунке 4.

Анализ фармакокинетических кривых свидетельствует о том, что при применении препаратов "Антиседан" и "Антимедин" скорость всасывания атипамезола, максимальная его концентрация и продолжительность удержания в крови существенно не различаются.

Результаты парного сравнения фармакокинетических параметров изучаемых препаратов показаны на трисунке 5.

Анализ рисунка 5 свидетельствует об отсутствии статистически значимых различий между фармакокинетическими параметрами атипамезола при применении собакам препаратов "Антиседан" и "Антимедин".

Заключение

В результате сравнительного изучения фармакокинетических параметров атипамезола при внутримышечном введении собакам препаратов "Антиседан" и "Антимедин" не выявлено статистически достоверных различий в его всасывании, достижении максимальных концентраций и удержания в крови.

Полученные результаты позволяют заключить, что "Антиседан" и "Антимедин" являются биоэквивалентными.

Список литературы

  1. Карева Е.Н. методическое пособие "Молекулярная фармакология антиадренергических средств", 2003
  2. Vaha-Vahe, A.T. (1990) The clinical effectiveness of atipamezol as a medetomedin antagonist in the dogs. J. vet. Pharmacol. Thezar 13, 198-205.
  3. Clinical effects and pharmacokinetics of medetomedine and its enantiomers in dogs. J. vet Pharmacol. Thezar. 23,15-20, 2000